龍膽苦苷含量測定:照高效液相色譜法(《中華人民共和國藥典》2010版 附錄VI D)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(25:75)為流動相;檢測波長為270nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備 取龍膽苦苷對照品適量, 精密稱定,加甲醇制成每l ml 含0.2mg的溶液,即得。供試品溶液的制備 取本品粉末(過四號篩)約0.5g,精密稱定,精密加人甲醇20ml,稱定重量,加熱回流15分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,濾液備用,精密量取續(xù)濾液2ml ,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注人液相色譜儀,測定,即得。本品按干燥品計算,龍膽含龍膽苦苷(C 1 6 H 2 0 9 )不得少于3. 0% ;堅龍膽含龍膽苦苷(C1S H 2 O s ) 不得少于1.5%
抗瘧作用:瑞香素在體內(nèi)、外均具有殺瘧原蟲裂殖體活性作用。體外在1~10μmol/L的劑量范圍內(nèi),對惡性瘧原蟲的殺裂殖體活性與同劑量的氯喹相似。而在感染伯氏瘧原蟲的小鼠中,灌胃瑞香素50、100mg/kg或腹腔注射瑞香素10、50、100mg/kg均有與氯喹灌胃10 mg/kg相似的抗瘧療效。此外,瑞香素單獨用藥,無明顯抗紅外期瘧原蟲作用。其抗瘧機(jī)制并非作為單純的鰲合劑剝奪或降低宿主紅細(xì)胞或瘧原蟲體內(nèi)的鐵儲備,而很可能是作為酶抑制劑定向結(jié)合于以鐵為活性中心的生物大分子,從而抑制這些與瘧原蟲生命攸關(guān)的酶活力,較終導(dǎo)致瘧原蟲的死亡。
抗卡氏肺孢子蟲包囊和滋養(yǎng)體作用:瑞香素在體外有一定的抗卡氏肺孢子蟲包囊和滋養(yǎng)體的作用,這種作用呈劑量依賴關(guān)系,在1~20μmol/L的濃度范圍內(nèi),隨藥物濃度增加,抑制Pc生長的效應(yīng)越大,對蟲體的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu)有影響,可以引起線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹,胞漿溶解并產(chǎn)生空泡。瑞香素可以與Fe2+ 以2:1比例螯合而很少與Mg2+ 螯合,用FeSO4預(yù)先同瑞香素螯合后,它可大大減弱對Pc生長影響,而預(yù)先用MgSO4處理的瑞香素對Pc的生長影響無明顯改變。提示瑞香素抗Pc的作用原理是螯合與Pc代謝密切相關(guān)的Fe,從而影響Pc的生長代謝。